ABSTRACT. Triazole fungicides have not been effective for managing the wheat blast disease in Brazil. A broad analysis across six geographical populations of Pyricularia graminis-tritici in central-southern Brazil indicated a high level of resistance to triazole fungicides. Since P. graminis-tritici is also associated with others poaceous species, here, we analyzed whether triazole-resistant isolates of the blast pathogen could be recovered from other poaceous hosts that are invasive of sprayed wheat fields. In addition to P. graminis-tritici (Pygt), we also evaluated the levels of sensitivity of three other grass-associated blast pathogens, which included P. grisea (Pg), P. pennisetigena (Pp), and P. urashimae (Pu). Resistance to the triazole fungicides tebuconazole and epoxiconazole was assessed phenotypically based on EC50 values and molecularly by analysis of the presence of mutations in the CYP51A gene, which encodes for the target enzyme 14-alpha-demethylase. We detected triazole-resistant Pyricularia spp. (Pg, Pp, Pu and Pygt) that is associated with Avena sativa, Cenchrus echinatus, Chloris distichophylla, Cynodon sp., Digitaria horizontalis, D. sanguinalis, Panicum maximum or Urochloa spp. The major outcome from our study was the evidence that invasive poaceous species from wheat fields could be an important source of triazole resistant fungal inoculum for the initial phases of the wheat blast epidemics.

RESUMO Esta pesquisa propõe a utilização de um método baseado em leitor automatizado de microplacas para detectar resistência a fungicidas triazóis (IDM) e estrobirulinas (IQe) em populações do fungo hemibiotrófico fitopatogênico Pyricularia graminis-tritici (Pygt) do trigo. A disponibilidade de método acurado, mais rápido e eficiente para a detecção da redução da sensibilidade a fungicidas contribuiria para facilitar a tomada de decisão sobre o manejo químico da brusone do trigo no país. Há informação sobre redução da sensibilidade de triazóis no controle da brusone do trigo e evidências da ocorrência generalizada de redução da sensibilidade à estrobilurinas em populações do patógeno no Brasil. O método de microplaca foi acurado em discriminar a variação fenotípica na sensibilidade entre isolados do patógeno aos fungicidas IDM tebuconazol e epoxiconazol e ao fungicida IQe azoxistrobina. Economicamente, ambos os métodos representam alto custo, portanto, é necessário comparar a eficiência desses métodos. O método de microplacas foi mais eficiente no uso de recursos, com custo operacional total 33% inferior ao do método de placas de Petri. Em conjunto, os fatores acurácia, rapidez e eficiência no uso de recursos indicaram que o método de microplaca pode ser utilizado no monitoramento da resistência a fungicidas em populações do fungo da brusone do trigo no agroecossistema brasileiro.

ABSTRACT This study proposes the application of a method based on an automated microplate reader to detect resistance to triazole (DMI) and strobilurin (QoI) fungicides in populations of the plant pathogenic hemibiotrophic fungus Pyricularia graminis-tritici (Pygt) from wheat. Availability of an accurate, more rapid and efficient method to detect eventual reduction in sensitivity to fungicides could contribute to facilitate the decision making on chemical management of wheat blast in the country. There are reports of reduction in the sensitivity of triazoles to control wheat blast and evidence of widespread reduction in the sensitivity to strobilurins in populations of the pathogen in Brazil. The microplate method was accurate in discriminating the phenotypic variation in sensitivity among isolates of the pathogen to the DMI fungicides tebuconazole and epoxiconazole and to the QoI fungicide azoxystrobin. Economically, both methods represent high cost, therefore, the efficiency of these methods should be compared. The microplate method was more efficient in the use of resources, with a total operating cost 33% inferior to that of the Petri dish method. Together, the factors accuracy, celerity and efficiency in the use of resources indicated that the microplate method can be used to monitor resistance to fungicides among populations of the wheat blast fungus in the Brazilian agroecosystem.

Os herbicidas representam 65% do consumo geral, sendo que o S-Metolachlor é um dos mais utilizados e está trazendo preocupações ambientais. Objetivamos detectar a degradação do S-Metolachlor por microorganismos de solos sob plantio. Foram identificadas as espécies bacterianas: Klebsiella pneumoniae pneumoniae GC s.B linhagem 1, Pseudomonas alcaligenes, Enterobacter aerogenes GC s.A e Klebsiella pneumoniae pneumoniae GC s.B linhagem 2. Resultados da curva de crescimento por espectrofotometria não permitiram definir diferentes fases, levando a pensar em uma fase Lag longa. Frascos de cultura demonstraram a formação de biofilme, provocando mudança na cor do herbicida, interferindo na leitura do crescimento. É possível a existência de fase Log, mas não detectável pelo método. Após 5 dias de incubação a 35ºC, a diferença média de concentração do S-Metolachlor foi de 14.42%, e em 10 dias, 35.01%. Observou-se o aparecimento de um halo em volta das colônias, o que corrobora a hipótese de degradação microbiana do herbicida.

The aim of this work was to study herbicide degradation through selected microorganisms from humus and soil subjected to different plantation systems. The following bacterial species were identified: Klebsiella pneumoniae pneumoniae GC s.B strain 1, Pseudomonas alcaligenes, Enterobacter aerogenes GC s.A and Klebsiella pneumoniae pneumoniae GC s.B strain 2. Growth studies yet suggested the possibility of a very long lag phase. Although, culture with the herbicide presented biofilm formation and there were color changes in the herbicide that could have interfered with the espectrophotometry readings. After 5 days of incubation at 35ºC, the difference in the concentration of herbicide was 14.42% on average and after 10 days, 35.01%.